2001年山东莱阳农学院科学家培育出了我国第一头体细胞克隆牛康康，回答下列问题：

1. (2017高二下·德州期末) 2001年山东莱阳农学院科学家培育出了我国第一头体细胞克隆牛康康，回答下列问题：
1. （1）欲获得供体牛的耳细胞，需用酶处理动物组织，对获得的细胞进行培养时要确保环境．
3. （2）从屠宰场已屠宰母牛卵巢中采集的卵母细胞需要人工培养到时期，原因是．
5. （3）欲获得多个胚胎可将牛囊胚进行分割，分割时需将内细胞团进行均分的目的是，并且可以利用囊胚的细胞进行性别鉴定．
7. （4）在培育克隆牛康康的过程中应用的生物技术有（至少写出3个）．

能力提升真题演练换一批

1. (2021高二下·南阳月考) 新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引发肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的黏附或入侵，下图为筛选、制备抗刺突蛋白单克隆抗体的示意图。回答下列问题：
1. （1）细胞X表示；诱导细胞X与Y融合常用的化学物质是；细胞Z中，能产生抗体的有（填“一种”或“多种”）。
2. （2）在进行细胞培养时，培养箱内需要提供的适宜生长环境是温度为37℃和一定浓度的CO₂等，其中CO₂的主要作用是。为防止培养过程中细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是。
3. （3）抗刺突蛋白单克隆抗体特异性强、灵敏度高，不仅可以用于新型冠状病毒肺炎的治疗，还可以用于新型冠状病毒的检测，某人的抗体检测呈阳性，而核酸检测呈阴性，原因可能是。
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2. (2021高二下·广东期中) 传统的生物医药基因工程常利用细菌、酵母菌等微生物及动物反应器进行医药蛋白的生产，酵母菌的过度糖基化会影响蛋白质的功能；多数动物培养基因表达程度低，需要昂贵的培养基，且培养基需要特殊的处理，利用植物组织培养则可克服这些缺点。回答下列问题∶
1. （1）不用细菌进行医药蛋白生产的原因是，根据题中信息，植物生产医药蛋白相对于酵母菌和动物等反应器的优点体现在。
2. （2）植物抗体是指动物抗体基因或基因片段在植物中表达的免疫产物。在小麦中表达的抗癌胚抗原的抗体已在临床上，发挥作用。利用农杆菌转化法将抗癌胚抗原的抗体的基因导入小麦体内时，基因通常插入到Ti质粒的上，才能将目的基因整合到小麦的染色体上。Ti质粒上还需有复制原点、。若检测目的基因是否表达，在分子水平上的检测方法是。
3. （3）将导入目的基因的小麦细胞培养成植株，需要利用技术，该技术的原理是。
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3. (2021高二下·咸阳期末) 垃圾分类无疑是最近最热的话题之一，我国有多个城市将垃圾分类纳入法制框架城市是由自然系统、经济系统和社会系统所组成的人工生态系统，对城市环境的治理要把整个城市作为一个巨大的生态系统来考虑，即用生态工程的方法对城市环境进行综合治理。回答下列问题：
1. （1）一般来说，生态工程的主要任务是对已破坏的生态环境进行修复，对进行改善，并提高生态系统的生产力。人类要实现可持续发展，必须走生态经济之路，生态经济所遵循的主要原则是。
2. （2）建设“海绵城市”（在适应环境变化和应对雨水带来的自然灾害等方面具有良好的“弹性”）的一个通常做法是做到雨水回收利用，城市蓄水池内不仅安装了现代化的雨水净化系统，还种植了许多水生植被辅助净化，这些植物的引种需遵循原理。建设“海绵城市”的目的之一是“扩大公共产品有效投资，提高新型城镇化质量，促进人与自然和谐发展”体现了原理。
3. （3）城市中的垃圾经过降解可减少对环境的污染，能降解垃圾的微生物属于生态系统的（成分）。根据生态工程方面的内容请你列举出一种实现城市垃圾的处理办法：。
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1. (2021·湖南) [选修3：现代生物科技专题]
M 基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M 基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M 基因失活的转基因克隆动物A，流程如图所示。回答下列问题：
1. （1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的断开。
2. （2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是。
3. （3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是。从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为（答出两点即可），功能上具有。
4. （4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M 基因是否失活的实验思路。
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2. (2022·北京) 生态文明建设已成为我国的基本国策。水中雌激素类物质（E物质）污染会导致鱼类雌性化等异常，并通过食物链影响人体健康和生态安全。原产南亚的斑马鱼，其肌细胞、生殖细胞等存在E物质受体，且幼体透明。科学家将绿色荧光蛋白（GFP）等基因转入斑马鱼，建立了一种经济且快速的水体E物质监测方法。
1. （1）将表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是。
2. （2）为监测E物质，研究者设计了下图所示的两种方案制备转基因斑马鱼，其中ERE和酵母来源的UAS是两种诱导型启动子，分别被E物质-受体复合物和酵母来源的Gal4蛋白特异性激活，启动下游基因表达。与方案1相比，方案2的主要优势是，因而被用于制备监测鱼（MO）。
3. （3）现拟制备一种不育的监测鱼SM，用于实际监测。SM需经MO和另一亲本（X）杂交获得。欲获得X，需从以下选项中选择启动子和基因，构建表达载体并转入野生型斑马鱼受精卵，经培育后进行筛选。请将选项的序号填入相应的方框中。
  Ⅰ.启动子：。
  
  ①ERE②UAS③使基因仅在生殖细胞表达的启动子（P生）④使基因仅在肌细胞表达的启动子（P肌）
  
  Ⅱ.基因：
  
  A．GFP B．Gal4 C．雌激素受体基因（ER） D．仅导致生殖细胞凋亡的基因（dg）
4. （4） SM不育的原因是：成体SM自身产生雌激素，与受体结合后造成不育。
5. （5）使拟用于实际监测的SM不育的目的是。
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3. (2021·浙江) 回答下列（1）、（2）小题：
1. （1）回答与甘蔗醋制作有关的问题：
  ①为了获得酿造甘蔗醋的高产菌株，以自然发酵的甘蔗渣为材料进行筛选。首先配制醋酸菌选择培养基：将适量的葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄溶解并定容，调节pH，再高压蒸汽灭菌，经后加入3%体积的无水乙醇。然后将10 g自然发酵的甘蔗渣加入选择培养基，震荡培养24 h。用将少量上述培养液涂布到含CaCO₃的分离培养基上，在30 ℃培养48h。再挑取分离培养基上具有的单菌落若干，分别接种到与分离培养基成分相同的培养基上培养24 h后，置于4 ℃冰箱中保存。
  
  ②优良产酸菌种筛选。将冰箱保存的菌种分别接入选择培养基，培养一段时间后，取合适接种量的菌液在30 ℃、150 r/min 条件下震荡培养。持续培养至培养液中醋酸浓度不再上升，或者培养液中含量达到最低时，发酵结束。筛选得到的优良菌种除了产酸量高外，还应有（答出2点即可）等特点。
  
  ③制醋过程中，可将甘蔗渣制作成固定化介质，经后用于发酵。其固定化方法为。
2. （2）斑马鱼是一种模式动物，体外受精发育，胚胎透明、便于观察，可用于水质监测，基因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。
  ①由于人类活动产生的生活污水日益增多，大量未经处理的污水直接排入河流、湖泊会引起水体，导致藻类大量繁殖形成水华。取水样喂养斑马鱼，可用斑马鱼每周的体重和死亡率等指标监测水体污染程度。
  
  ②为了研究某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制，用 DNA 连接酶将该基因连接到质粒载体形成，导入到大肠杆菌菌株 DH5α 中。为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的 DH5α 阳性细胞克降，质粒载体应含有（答出2点即可）。提取质粒后，采用法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中，培养并观察转基因斑马鱼胚胎血管的发育情况。
  
  ③为了获取大量斑马鱼胚胎细胞用于药物筛选，可用分散斑马鱼囊胚的内细胞团，取分散细胞作为初始材料进行培养。培养瓶中添加成纤维细胞作为，以提高斑马鱼胚胎细胞克隆的形成率。
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山东省德州市2016-2017学年高二下学期生物期末考试试卷

1. (2017高二下·德州期末) 2001年山东莱阳农学院科学家培育出了我国第一头体细胞克隆牛康康，回答下列问题：

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