| 可可碱浓度/（mmol·L－1） |
根尖细胞有丝分裂 |
种子发芽率/％ |
|||
| 有丝分裂指数/％ |
分裂期细胞占比/％ |
||||
| 前期和中期 |
后期和末期 |
||||
| 0 |
3.73 |
3.04 |
0.69 |
81.5 |
|
| 0.1 |
2.90 |
2.16 |
0.74 |
68.1 |
|
| 0.5 |
2.10 |
1.72 |
0.38 |
18.6 |
|
| 1.0 |
1.96 |
1.72 |
0.24 |
2.3 |
|
注：有丝分裂指数=分裂期细胞数/观察细胞的总数×100%
图1水体浮游藻类叶绿素a浓度变化
图2实验结束时苦草相对生长率
据图回答下列问题：
图1抗草甘膦外源基因结构图（CaMV35S为外源启动子、NOS为外源终止子）
①在确定扩增对象后，从中获得待扩增基因序列，以此为依据可设计引物。该小组拟定的引物设计如表所示，其引物设计有一个是不科学的，请指出并说明原因。
|
基因 |
引物序列 |
产物片段大小 |
基因来源 |
|
Lectin |
F-5' GCC CTC TAC TCC ACC CCC ATC C-3' R-5' GCC CAT CTG CAA GCC TTT TTG TG-3' |
118 |
内源基因 |
|
CaMV35S |
F-5' GGG ATT-3' R-5' AAT CCC-3' |
195 |
外源基因 |
|
NOS |
F-5' GAA TCC TGT TGC CGG TCT TG -3' R-5' TTA TCC TAG TTT GCG CGC TA -3' |
180 |
外源基因 |
|
CP4-EPSPS |
F-5' CTT CTG TGC TGT AGC CAC TGA TGC-3 R-5' CCA CTA TCC TTC GCA AGA CCC TTC C-3 |
320 |
外源基因 |
注：内源基因指大豆基因组内基因，外源基因指大豆基因组外基因。
②PCR扩增：在4个反应体系中分别加入（模板）、相应引物、酶、4种脱氧核苷酸等，并将PCR仪的温度设定为：变性94℃ 30s、复性58℃ 30s、延伸72℃ 40s，循环30次。“延伸”的温度设定为72℃，是因为该温度下。在设定的PCR体系下可以特异性扩增目标DNA片段，主要是因为具有特异性。
图2 NOS终止子PCR反应产物电泳分析
图3 内源基因lectin PCR反应产物电泳分析
注：M：标准参照物，1：阳性对照（基因标准品），2：阴性对照（普通大豆），3：核酸提取空白对照，4：待鉴定样本。
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组别 |
亲本 |
F1 |
|
一 |
多节雄性×少节雌性 |
多节雄性：少节雄性：多节雌性：少节雌性=1：1：1：1 |
|
二 |
多节雄性×中节雌性 |
多节雄性：中节雄性：多节雌性：中节雌性=1：1：1：1 |
|
三 |
中节雄性×多节雌性 |
多节雄性：中节雌性：少节雌性=2：1：1 |
|
四 |
少节雄性×多节雌性 |
① |
|
五 |
中节雄性×少节雌性 |
② |
