1. 与石油农业相比，无废弃物农业的主要优点是（   ）

（1） 卒中、脑梗、心梗等心脑血管病多是因动脉粥样硬化、血栓引起组织缺血所致。血栓由纤维蛋白构成，组织型纤溶酶原激活剂（t-PA） 由527个氨基酸构成（如下图）， t-PA 进入血浆后激活纤溶酶原， 使之转化成纤溶酶， 酶将沉积在血管内壁的纤维蛋白分解血栓裂解， 血管畅通。t-PA进入血浆后多与纤溶酶原激活剂抑制物形成复合物，很快失去活性，所以溶栓时要持续输入t-PA。然而， 大剂量t-PA易诱发出血。鉴于此， 有人提出通过抑制的活性， 以延长t-PA的活性。进一步研究显示，t-PA第84位的半胱氨酸替换为丝氨酸后的t-PA溶血栓更快， 这种改造的t-PA副作用更小。用生物化学手段直接改造“t-PA”蛋白质的结构，或是定点改造 t-PA 基因成为“突变基因”，通过基因工程等生物工程技术获取“突变的t-PA”。通过后者改造“t-PA”的主要优势是（写出一点）。

（2） 已知t-PA基因碱基序列、丝氨酸密码子，可以通过人工合成目的基因（t-PA 突变基因） 、基因与质粒重组构建表达载体、表达载体进入受体细胞等一系列操作，最终获取“突变的t-PA”。这种基于t-PA的分子结构和功能的关系，通过一系列DNA 分子层面的操作获取人类所需蛋白产品的第二代基因工程过程又叫做。

（3） 从上述人t-PA 基因获得第84位半胱氨酸替换为丝氨酸编码序列的t-PA突变基因，常借助PCR体外定点定向诱变获得。工作原理如图： 先合成包含突变碱基的两个突变引物。因突变点不位于基因端点，要借助 PCR 获得完整的t-PA 突变基因，还要合成两个正常引物1、2.参考图中正常引物1（5'-TACCAAGTGATCTGCAGA-3'）、t-PA 基因和 PCR 诱变过程原理图， 正常引物2 是5’……-3’（写出5’端的6个碱基即可）

（4） 为了与质粒高效连接，t-PA突变基因两端应携带相应的限制酶识别序列。应将限制酶识别序列设计在两条正常引物的端。限制酶能够使 DNA 分子中特定部位的键断开。

（1） 科研人员将选择时期的胚胎移植到两只共生小鼠的子宫中。

（2） 早期胚胎获取可从供体的中冲取，完成此操作的生理学基础是。

（3） 该项研究中将雄性大鼠和雌性大鼠共生的目的是。

（4） 若通过基因编辑技术切除所得受精卵中的BMALI基因（生物节律核心基因），可培育出BMALI基因敲除的小鼠。基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白组成，由sgRNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。请回答：

①图中Cas9-sgRNA复合体通常用方法注入受体细胞；基因编辑工具中对基因进行剪切的是。

②sgRNA能与靶DNA分子特异性识别、结合的原理是。

③若BMALI基因敲除成功，从个体水平鉴定，小鼠表现为。

（1） 实验思路：

①将睾丸酮、雌二醇和动物细胞培养液按以下方案进行混合：T₀E₈、T₂E₆、T₄E₄、T₆E₂和T₈E₀。将分别加入编号为A，B，C，D、E和F的多孔细胞培养板中。

②挑取36只，，分别置于上述6个6孔细胞培养板中培养。

③每4-6小时观察一次，24小时更换培养基。移除刚出生幼体，实验至。记录每只卜氏晶囊轮虫母体的存活时间。对上述所得的实验数据进行分析和处理。

（2） 请设计一个表格用于记录实验结果（只需以A、B两组为例）。

（3） 分析与讨论：

①卜氏晶囊雌性轮虫可在环境良好时，产生不需要受精即能迅速发育成雌性个体的非需受精卵，该非需受精卵形成的分裂过程中（发生/不发生）减数分裂。

②研究发现不同组合浓度的睾丸酮和雌二醇对卜氏晶囊轮虫的寿命会产生显著影响并且卜氏晶囊轮虫对雌二醇表现更为敏感，两种激素呈现出（协同/拮抗）作用。