①EcoRV酶切位点为 ,该酶切出来的线性载体P1的末端为。
②图中①为过程。
③用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下,形成重组质粒P3。
④导入大肠杆菌后,为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。根据表结果判断,应选择菌落(A/B/C)类。
菌落类型 平板类型 |
A |
B |
C |
无抗生素 |
+ |
+ |
+ |
氨苄青霉素 |
+ |
+ |
- |
四环素 |
+ |
- |
- |
氨苄青霉素+四环素 |
+ |
- |
- |