1. (2023高二下·合肥期末) 脑血栓是威胁人类健康的常见疾病，研究发现人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。通过基因工程技术可以大量制备基因工程药物t-PA。

1. （1） 研究人员采用PCR技术可以获得大量t-PA基因，PCR的原理是 ， 此外，除上述外获得t-PA基因的方法还有（答出1种即可）。
3. （2） 研究表明，为心梗患者注射大量t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高，若将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。（注：如图乙表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒，新霉素为抗生素。）请回答下列问题：

   ①以上制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程被称为。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为。

   ②如图所示，需选用限制酶XmaI和切开质粒pCLY11，才能与t-PA改良基因高效连接。与单一酶酶切相比，本操作采用的双酶切方法的优点是。

5. （3） 将连接好的质粒DNA导入大肠杆菌，含t-PA改良基因重组质粒的细胞应具有的性状是____。

   A . 新霉素抗性且呈蓝色 B . 新霉素敏感且呈蓝色 C . 新霉素抗性且呈白色 D . 新霉素敏感且呈白色