1. (2021·天津) 乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的工程菌株。下图1为乳酸和乙醇发酵途径示意图，图2为构建表达载体时所需的关键条件。

1. （1） 乳酸脱氢酶在转基因酿酒酵母中参与厌氧发酵的场所应为。
3. （2） 获得转基因酿酒酵母菌株的过程如下：

   ①设计引物扩增乳酸脱氢酶编码序列。

   为使扩增出的序列中编码起始密码子的序列由原核生物偏好的GTG转变为真核生物偏好的ATG，且能通过双酶切以正确方向插入质粒，需设计引物1和2。其中引物1的5′端序列应考虑和。

   ②将上述PCR产物和质粒重组后，导入大肠杆菌，筛选、鉴定，扩增重组质粒。重组质粒上有，所以能在大肠杆菌中扩增。启动子存在物种特异性，易被本物种的转录系统识别并启动转录，因此重组质粒上的乳酸脱氢酶编码序列（能/不能）在大肠杆菌中高效表达。

   ③提取重组质粒并转入不能合成尿嘧啶的酿酒酵母菌株，在的固体培养基上筛选出转基因酿酒酵母，并进行鉴定。

5. （3） 以葡萄糖为碳源，利用该转基因酿酒酵母进行厌氧发酵，结果既产生乳酸，也产生乙醇。若想进一步提高其乳酸产量，下列措施中不合理的是___________（单选）。

   A . 进一步优化发酵条件 B . 使用乳酸菌LDH基因自身的启动子 C . 敲除酿酒酵母的丙酮酸脱羧酶基因 D . 对转基因酿酒酵母进行诱变育种