请回下面与微生物培养和应用有关的问题：

1. (2017·葫芦岛模拟) 请回下面与微生物培养和应用有关的问题：
1. （1）在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止的入侵；对微生物的接种工具，如接种环、接种针等通常采用的灭菌方法是．
3. （2）常用的微生物接种方法有2种，其中方法常用于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比活菌的实际数目．
5. （3）农作物秸秆中含有大量的纤维素，利用微生物可以将纤维素转化为酒精以供人类所需．将纤维素转化为酒精需要先将纤维素转化为葡萄糖，将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶，它包括C₁酶、C_X酶和，将葡萄糖转化为酒精的微生物是（填“真核”或“原核”）生物．
7. （4）如表是分离某种微生物的培养基配方：
  成分
  MgSO₄
  葡萄糖
  X物质
  蒸馏水
  琼脂
  用量
  5g
  10g
  7g
  1000mL
  20g
  表中X物质最可能作为该培养基的，培养基中添加琼脂的作用是．

能力提升真题演练换一批

1. (2022·杭州模拟) 回答下列（一）、（二）小题：
（一）起泡葡萄酒是指含有一定量CO₂的葡萄汽酒，需要使用产气能力强的专用酵母菌进行酿造。
1. （1）酿酒酵母的分离：从等富含酵母菌处取样。将样品置于适量中，进行振荡，静置后进行梯度稀释，并均匀于醛母菌平板培养基进行分离。
2. （2）优良起泡酵母菌种筛选：将分离得到的酿酒酵母分别接种于酵母菌培养基中，15℃培养24h后，观测记录产气量。筛选得到的优良菌种除产气能力、酒精耐受能力、耐酸能力强外，还应有（答出1点即可）等特点。
3. （3）起泡葡萄酒发酵：首先，将葡萄与普通酿酒酵母混合，置于25℃条件下，进行常规发酵。当观察到表示发酵完毕，获得葡萄酒原酒。随后，原酒经过一定的调配和勾兑后，在其中加入适量和蔗糖，装瓶密封，置于15℃条件下，进行成二次发酵。
4. （4）葡萄酒风味优化：β–葡萄糖苷酶（BGL）对于提升葡萄酒的香味十分重要。为增加BCL的稳定性，可将其通过氢键及分子间的作用力固定于壳聚糖凝胶，此固定化方法为。
5. （5）某科研团队以新冠病毒的刺突蛋白基因为目的基因，pCMV质粒为载体研制新冠疫苗。目的基因及质粒的限制性核酸内切酶的酶切位点如图所示。
  为了获得重组DNA分子，应当挑选的限制性核酸内切酶是，此外还需酶。将重组DNA分子导入大肠杆菌时，需先用处理使大肠杆菌处于感受态，待转化完成后再加入（A、仅含青霉素；B、仅含一种其余抗生素；C、不含抗生素；D．含多种抗生素）的LB液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间以恢复正常状态。
6. （6）为更好地研究新冠患者的病症及治疗办法，我国科学家成功研发了新冠病毒小鼠模型。已知新冠病毒通过识别人肺部细胞表面的受体（ACE2蛋白）进入人体细胞，但小鼠却并不含人的ACE2基因。因此，科学家将导入鼠的受精卵，经后得到转基因鼠。接下来，可对转基因鼠进行处理，以观察其呈现的病症并测试药物的活性。
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2. (2022·齐齐哈尔模拟) 碱性蛋白酶具有较强的耐碱、耐热及水解蛋白质的能力，主要用于洗涤剂工业生产，尤其是衣服和餐具洗涤剂的生产。碱性蛋白酶主要来源于枯草芽孢杆菌。回答下列问题：
1. （1）将枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基中，37℃，200转/min条件下培养。机械搅拌通风、发酵罐保持匀速转动有利于提高碱性蛋白酶的产量，原因是。
2. （2）发酵过程中定期取发酵液进行8000转/min离心，取上清液测定碱性蛋白酶的活力。酶活力单位为：在温度为40℃，pH为10.5条件下，1min内水解1mmoL酪素所需的。测定酶活力需要在一定的温度和pH条件下进行，说明酶具有的特性。某同学分别用乳糖、葡萄糖、蔗糖、糊精、可溶性淀粉配制发酵液，接种枯草芽孢杆菌发酵60h后，取发酵上清液测定并比较碱性蛋白酶的活力，该实验的课题是。
3. （3）加酶洗衣粉中常用的四种酶制剂除了碱性蛋白酶，还有脂肪酶、。洗涤剂中表面活性剂会改变蛋白酶的而降低其活力。为了保护洗涤剂中的酶制剂，解决的措施是。
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3. (2023·浙江模拟) 普通酵母菌利用淀粉的效率较低。研究人员将某海洋细菌中α-淀粉酶分子（B）基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。请回答下列问题：
1. （1）采用PCR技术扩增B基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的（3'端/5'端）。
2. （2）通常需提取大肠杆菌的质粒用来构建B基因的表达载体。提取的主要步骤是培养大肠杆菌→裂解菌体→质粒DNA的复性→离心提取→鉴定。在裂解菌体时需添加溶液Ⅱ（主要成分为EDTA）、溶液I（主要成分为SDS），添加顺序是先加，5min后再加。在所提取的质粒上还需添加（海洋细菌/大肠杆菌/酶母菌）的启动子、终止子等。
3. （3）在将B基因导人酵母细胞前，需先将酵母菌置于含醋酸锂的培养液中培养一段时间，从而提高转化效率。由此推测，醋酸锂的培养液可用于制备。
4. （4）用B抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应。这为分离、纯化B蛋白提供的启示是。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种了工程酵母菌的发酵罐需要率先排气，其原因是。
5. （5）如果将B的丝氨酸变成亮氨酸，改变后的α-淀粉酶分子（B）不但保留B的功能，而且具更高的催化活性。以B基因序列为基础，获得B₁基因的途径有修饰基因或合成基因。
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1. (2021·全国乙卷) [生物-选修：生物技术实践]
工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程，利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。

回答下列问题：
1. （1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供。
2. （2）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖、大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的、能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和。米曲发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于(填“自养厌氧”*异养厌氧”或“异养好氧")微生物。
3. （3）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于(填“真核生物“或“原核生物”)；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是(答出1点即可)。
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2. (2023·浙江) 甲植物细胞核基因具有耐盐碱效应，乙植物细胞质基因具有高产效应。某研究小组用甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交相关研究，基本过程包括获取原生质体、诱导原生质体融合、筛选融合细胞、杂种植林再生和鉴定，最终获得高产耐盐碱再生植株。回答下列问题：
1. （1）根据研究目标，在甲、乙两种植物细胞进行体细胞杂交前，应检验两种植物的原生质体是否具备的能力。为了便于观察细胞融合的状况，通常用不同颜色的原生质体进行融合，若甲植物原生质体采用幼苗的根为外植体，则乙植物可用幼苗的为外植体。
2. （2）植物细胞壁的主要成分为和果胶，在获取原生质体时，常采用相应的酶进行去壁处理。在原生质体融合前，需对原生质体进行处理，分别使甲原生质体和乙原生质体的失活。对处理后的原生质体在显微镜下用计数，确定原生质体密度。两种原生质体1：1混合后，通过添加适宜浓度的PEG进行融合；一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是。
3. （3）将融合原生质体悬浮液和液态的琼脂糖混合，在凝固前倒入培养血，融合原生质体分散固定在平板中，并独立生长、分裂形成愈伤组织。同一块愈伤组织所有细胞源于。下列各项中能说明这些愈伤组织只能来自于杂种细胞的理由是哪几项？（A.甲、乙原生质体经处理后失活，无法正常生长、分裂B.同种融合的原生质体因甲或乙原生质体失活而不能生长、分裂C.培养基含有抑制物质，只有杂种细胞才能正常生长、分裂D.杂种细胞由于结构和功能完整可以生长、分裂）
4. （4）愈伤组织经可形成胚状体或芽。胚状体能长出，直接发育形成再生植株。
5. （5）用PCR技术鉴定再生植株。已知甲植物细胞核具有特异性DNA序列a，乙植物细胞质具有特异性DNA序列b；M₁、M₂为序列a的特异性引物，N₁、N₂为序列b的特异性引物。完善实验思路：
  I.提取纯化再生植株的总DNA，作为PCR扩增的。
  Ⅱ.将DNA提取物加入PCR反应体系，为特异性引物，扩增序列a；用同样的方法扩增序列b。
  
  Ⅲ.得到的2个PCR扩增产物经后，若每个PCR扩增产物在凝胶中均出现了预期的个条带，则可初步确定再生植株来自于杂种细胞。
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3. (2022·浙江) 回答下列（1）、（2）小题：
1. （1）回答与产淀粉酶的枯草杆菌育种有关的问题：
  Ⅰ.为快速分离产淀粉酶的枯草杆菌，可将土样用制成悬液，再将含有悬液的三角瓶置于80℃的中保温一段时间，其目的是。
  
  Ⅱ.为提高筛选效率，可将菌种的过程与菌种的产酶性能测定一起进行：将上述悬液稀释后涂布于淀粉为唯一碳源的固体培养基上培养，采用显色方法，根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产酶及产酶性能。
  
  Ⅲ.为了获得高产淀粉酶的枯草杆菌，可利用现有菌种，通过后再筛选获得，或利用转基因、等技术获得。
2. （2）回答与植物转基因和植物克隆有关的问题：
  Ⅳ.在用农杆菌侵染的方法进行植物转基因过程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生长，二是筛选转化细胞。当选择培养基中抗生素浓度时，通常会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行抗生素的检测。
  
  Ⅴ.为提高培育转基因植株的成功率，植物转基因受体需具有较强的能力和遗传稳定性。对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测，可通过观察细胞内形态是否改变进行判断，也可通过观察分裂期染色体的，分析染色体组型是否改变进行判断。
  
  Ⅵ.植物转基因受体全能性表达程度的高低主要与受体的基因型、培养环境、继代次数和长短等有关。同时也与受体的取材有关，其中受体为时全能性表达能力最高。
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使用过本题的试卷

2017年辽宁省葫芦岛市高考生物二模试卷

成分	MgSO₄	葡萄糖	X物质	蒸馏水	琼脂
用量	5g	10g	7g	1000mL	20g

1. (2017·葫芦岛模拟) 请回下面与微生物培养和应用有关的问题：

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