江苏省南京航空航天大学苏州附属中学2021-2022学年高二...

更新时间：2022-05-26 浏览次数：60 类型：期中考试

一、单选题

1. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养。下列说法正确的是（　　）

A . 牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH B . 蛋白胨可为大肠杆菌生长提供氮源、碳源和维生素 C . 倒平板操作中，平板未凝固时迅速将平板倒过来放置 D . 为区分恒温培养箱中不同的培养皿，应该在其皿盖做好标记

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2. 下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述中，错误的是（）

A . 用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌 B . 平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数 C . 稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散 D . 用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大

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3. 为了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，某研究小组进行了相关药敏实验，下图1为部分实验器材。将含有相同浓度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，实验结果如下图2。下列相关叙述正确的是（　　）

A . 为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中器材①② B . 图2中Ⅱ形成的抑菌圈较小，可能是病原微生物对药物较敏感 C . 图2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下产生了突变株 D . 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会影响实验结果

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4. 从某污水处理系统中分离出多种细菌，经进一步筛选获得具有高效降低污水中有机污染物（COD为有机污染物分解时化学需氧量）能力的菌株，过程如下图所示。下列相关说法错误的是（　　）

A . 牛肉膏蛋白胨培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B . 若采用题目中分离纯化方法进行计数，计数结果比实际值小 C . 图中平板划线法获得的菌落具有不同的菌落特征 D . 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株

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5. 图表示利用铁皮石斛新生营养芽诱导培育出的拟原球茎(简称PLBs)，在不同条件下生产生物碱的实验结果。下列叙述正确的是（）

A . 通常在培养基中添加葡萄糖用于调节渗透压 B . 选取的新生营养芽外植体需灭菌后再诱导培育 C . 黑暗条件不利于叶绿素的合成，光合作用无法进行 D . 光照条件下PLBs的重量与生物碱含量成正相关

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6. 如下图所示为农作物新品种的育种方式，相关叙述错误的是（　　）

A . ②③过程分别称为脱分化和再分化，开辟了植物繁殖的新途径 B . ⑤过程中若连接的是黏性末端，则可使用E·coliDNA连接酶 C . ①过程为植物体细胞杂交技术，可通过是否再生细胞壁鉴定杂种细胞 D . 若要获得耐盐突变体，可对愈伤组织进行化学或物理的诱变处理

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7. Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因，可以利用PCR技术检测其转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bcl-2基因转录水平检测流程，下列说法错误的是（）

A . 图中A细胞表示去核的卵母细胞，B细胞表示体细胞 B . 在早期胚胎发育的不同时期提取的总mRNA是不同的 C . 图中过程X表示逆转录，获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序 D . 在PCR过程中，（Bcl-2 cDNA）/cDNA的比值反映Bcl-2基因的转录水平

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8. 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。相关叙述正确的是（　　）
　　

A . ①过程所用的促融方法与植物体细胞杂交完全相同 B . ③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测 C . 应给小鼠多次注射HCG，以获得较多的记忆细胞 D . ④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染

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9. 某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养，下列叙述正确的是(　　)

A . 制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理 B . 肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO₂刺激细胞呼吸 C . 为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D . 用血球计数板计数的方法，可推断乙细胞比甲细胞增殖周期长

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10. 下图是用基因工程技术培育抗棉铃虫的转基因棉花过程，有关该过程叙述错误的是（）

A . 抗虫基因的表达产物为多肽 B . 抗虫基因的插入不会改变受体细胞的染色体结构 C . 受体细胞除去细胞壁更利于基因的导入 D . 通过Ti质粒上的抗性基因筛选试管苗

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11. (2017高三上·丰台期末) 土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T﹣DNA片段转入植物的基因组．利用农杆菌以Ti质粒作为运载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（）

A . 目的基因应插入T﹣DNA片段外，以防止破坏T﹣DNA B . 用Ca²⁺处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞 C . Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNA D . T﹣DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体

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12. 科学家通过转入四种基因，可使体细胞形成诱导性多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠是由iPS细胞发育而来并可繁殖后代，实验流程如图所示。下列叙述错误的是（）

A . 可用显微注射法或用经过修饰的病毒导入四种基因 B . 克隆鼠的体色为黑色且染色体组数与黑鼠相同 C . 灰鼠受精卵第一次卵裂生成的子细胞经电激诱导两两融合后可发育成四倍体囊胚 D . 该实验过程中使用到的技术有体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术

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13. (2021·南京模拟) 下列与果酒、果醋和泡菜制作有关的叙述，正确的是（）

A . 制作果醋的前提是制作果酒，因为醋酸菌可将酒精氧化为醋酸 B . 通常情况下，泡菜制作1~2天即可食用，并需偶尔进行排气操作 C . 使用的菌种通常取自于自然环境，若要提高产品品质，可接种优良菌种 D . 所用制作原料和器具都需要进行严格灭菌，且发酵全过程都需在无菌环境

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14. (2018·南通模拟) 下图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的是（）

A . 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化 B . 过程②用Ca²⁺处理可提高转化成功率 C . 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K D . 筛选得到的A是无农杆菌附着的转化愈伤组织

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二、多选题

15. 运用转基因技术，将奶牛细胞中编码凝乳酶的基因转移到大肠杆菌细胞中，达到大规模生产凝乳酶的目的。下图表示用作运载体的质粒和目的基因所在DNA片段。下列操作与实验目的相符的是（）

A . 用限制酶BamHⅠ、PstⅠ和DNA连接酶构建基因的表达载体 B . 用含氨苄青霉素的培养基筛选出的即为导入目的基因的细菌 C . 可用PCR技术大量扩增目的基因 D . 用Ca²^﹢处理大肠杆菌使其易于转化

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16. 日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是（）

A . 通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物 B . 以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等 C . 两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同 D . 该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养

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17. (2021·苏州模拟) 从红豆杉属植物中提取分离出的紫杉醇是一种有效的抗癌药物，自然状态下红豆杉生长慢，紫杉醇含量低，通过植物细胞悬浮培养技术可获得大量紫杉醇。植物细胞悬浮培养是指将游离的单细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培养基中，用摇床或转床进行大规模培养的方法。通过不断的继代培养筛选出疏松性均匀一致、分散性良好、大小大致相同的细胞和细胞团，建立悬浮培养细胞系。据图叙述正确的是（）

A . 离体的红豆杉组织细胞通过果胶酶分散处理后直接进行悬浮培养 B . 悬浮培养液中大多数细胞在形态上呈等径形，核-质比率大，胞质浓厚，液泡化程度高 C . 植物细胞悬浮培养培养液中一般细胞分裂素与生长素含量比值小于1 D . 植物细胞悬浮培养中植物细胞生长没有接触抑制，因此只要空间足够大，就可以扩大培养。

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18. 下列有关“基因污染”叙述中，正确的是（　　）

A . 转基因生物有可能成为“外来物种”，影响生态系统的稳定性 B . 转基因生物的外源基因本身来源于自然界，故不存在“基因污染”的问题 C . 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” D . “基因污染”有可能会从一种生物扩散到其它多种生物物种

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19. (2021·南京模拟) 下图为单克隆抗体制备过程示意图。下列有关叙述正确的是（）

A . X细胞是从脾脏中提取的已免疫的B淋巴细胞 B . Y细胞是杂交瘤细胞，通常取用培养10代以内的细胞 C . 图中筛选过程至少两次且方法不同，最终保留抗体检测呈阳性的细胞 D . 图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象

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三、综合题

20. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题：
1. （1）过程①所需的酶是。
2. （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
3. （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。原生质体经过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
4. （4）脱分化形成的愈伤组织在、两种植物激素的作用下，经过程形成再生植株。
5. （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1～4进行PCR扩增的结果。据下图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有。
6. （6）对杂种植株进行接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
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21. 某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。回答下列问题：
1. （1）配制酵母菌培养液时，需控制培养液的浓度，浓度过高则会导致另需加入一定剂量的青霉素等抗生素，其目的是，对培养液进行灭菌时，切断高压蒸汽灭菌锅热源后，须待观察到时，才能打开放气阀以释放锅内余气，最后开启锅盖取出培养液。
2. （2）该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150r/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是。
3. （3）图2是采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线，下列判断依据中正确的有。
  ①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落
  ②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数
  ③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起长成一个菌落
  ④采用稀释涂布平板法计数时，因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
4. （4）通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的4个平板上菌落数分别为69个、52个、44个、26个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为个。
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22. 下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题：
1. （1）图1所示过程所用的生物技术有，将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次以上，其目的是。
2. （2）将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中，至少要进行两次筛选，一次是通过培养基，筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
3. （3）通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X，其原因是该抗体具有的特点。
4. （4）培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清，原因是，提供气体条件CO₂的作用，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是。
5. （5）图2中的早期胚胎发育到阶段才可以移植，在移植之前，需要进行质量检查，用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是。为了获得多个基因型相同的优质奶牛，可采用的技术手段是。
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23. 为培育转固氮基因的小麦新品种，科研人员利用土壤农杆菌的Ti质粒和普通质粒按下图构建了双元载体系统（Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒），图中vir基因编码产物能激活T-DNA转移，ori为复制原点，tmr和tms为致瘤基因，LB和RB为T-DNA两端的重复序列，kan为卡那霉素抗性基因，ter 为四环素抗性基因。下表是几种限制酶识别序列及切割位点。请回答下列问题：
限制酶
EcoR I
BamH I
Sau3A I
BclI
SmaI
Xmal
识别序列及切糖粒点
- G↓AATTC-
- G↓GATOC-
-↓GATC-
-T↓GATCA-
- CCC↓GGG-
-C↓CCGGG-
1. （1）研究发现T-DNA的RB序列相当保守，是由于该序列的突变类型在过程中被淘汰。
2. （2）双子叶植物受到损伤时，伤口处的细胞分泌大量酚类化合物会吸引农杆菌移向这些细胞。农杆菌一般难以感染小麦等单子叶植物，若想提高农杆菌转化小麦的成功率，可采取的方法是。·T-DNA转移至植物细胞可使植物患“肿瘤”，研究发现“肿瘤”的发生与植物激素有关，据此推测T-DNA中致瘤基因tmr、tms 可能与等植物激素的合成有关。
3. （3）为防止植物形成“肿瘤”，研究人员按上图构建了双元载体系统。图中过程①需先用制酶处理Ti质粒以去除致瘤基因，再用酶将经过处理的固氮基因接入Ti质粒，以构建重组质粒；过程②用限制酶处理重组质粒，获得含vir基因的DNA片段和含固氮基因的T-DNA，再经过程③、④分别构建Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒。
4. （4）科研人员用限制酶EcoRI和SauBAI处理T-DNA给体质粒，完全酶切后可以得到含条带的凝胶电泳图谱。
5. （5）将构建的Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒通过方法同时导入土壤农杆菌内，选择在含有的培养基上能形成菌落的土壤农杆菌去感染小麦细胞。该过程中T-DNA给体质粒并不含有vir基因，但仍能将转化成功的原因是。
6. （6）种植转基因固氮小麦，在环境保护上的重要意义有。
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24. 科研人员通过转基因技术培育出超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，含P基因的DNA片段以及Ti质粒的酶切位点如下图所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。请回答下列问题。
限制酶
识别序列
ClaⅠ
5′AT↓CGAT3′
BamHⅠ
5′G↓GATCC3′
HindⅢ
5′A↓AGCTT3′
EcoRⅠ
5′G↓AATTC3′
KpnⅠ
5′GGTAC↓C3′
SacⅠ
5′GAGCT↓C3′
1. （1）以RNA为模板，通过RT-PCR技术可获取P基因。进行RT–PCR时一般要加入4种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，其原因是，同时需加入的酶有。为了特异性扩增P基因序列，需根据设计特异性引物。
2. （2）在构建基因表达载体时，应优先选用的限制酶是和，这样操作不仅使P基因在玉米植株中超量表达，还可利用T-DNA的特性，最终使P基因。
3. （3）将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养时，培养基中需加入，筛选出的愈伤组织经再分化过程形成丛芽，最终获得转基因玉米植株。
4. （4）对转基因再生玉米植株进行鉴定时发现，有些植株虽有P基因，但几乎没有P蛋白，造成该现象的原因可能有。
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试卷信息

小学

初中

高中

江苏省南京航空航天大学苏州附属中学2021-2022学年高二...

副标题：

*注意事项：

江苏省南京航空航天大学苏州附属中学2021-2022学年高二...

试题分析

总体分析

题量分析

难度分析

知识点分析

限制酶	EcoR I	BamH I	Sau3A I	BclI	SmaI	Xmal
识别序列及切糖粒点	- G↓AATTC-	- G↓GATOC-	-↓GATC-	-T↓GATCA-	- CCC↓GGG-	-C↓CCGGG-

限制酶	识别序列
ClaⅠ	5′AT↓CGAT3′
BamHⅠ	5′G↓GATCC3′
HindⅢ	5′A↓AGCTT3′
EcoRⅠ	5′G↓AATTC3′
KpnⅠ	5′GGTAC↓C3′
SacⅠ	5′GAGCT↓C3′